Mike Wazowski entra na Universidade Monstros para realizar seu sonho de se tornar um assustador na Monstros S.A. Logo conhece seu companheiro de quarto, o tímido Randall Boggs, que sonha em se tornar popular, e o arrogante e brincalhão James P. Sullivan, ambos no mesmo curso que ele. Após Sulley raptar o mascote da universidade e Mike ajudar a capturá-lo, Sulley é convidado para se unir à fraternidade Ruge Ômega Ruge (RΩR), formada pelos mais populares monstros da Universidade. O desprezo a Mike quando ele tenta tomar crédito acaba por gerar uma rivalidade entre os dois.
Durante o exame final do primeiro semestre, uma briga entre Mike e Sulley cria confusão e faz a rígida Hardscrabble, reitora da UM, expulsar ambos do curso de assustadores, além da RΩR remover Sulley de seus membros e em seu lugar incluir Randall, que se torna um dos populares da faculdade. Ao ver um torneio universitário de assustadores, Mike tenta se inscrever para provar seus méritos como assustador. Visto que para participar é preciso ser parte de uma fraternidade, Mike é forçado a se unir ao rival Sulley e quatro estudantes desajustados e impopulares que formam a fraternidade Oozma Kappa: Don Carlton, um vendedor adulto que decidiu voltar para a faculdade; o tímido e inseguro Scott “Esguicho” Squibbles; o excêntrico Art; e os monstros dividindo o mesmo corpo Terri e Terry Perry.
A turma acaba avançando aos poucos no torneio até chegar a final. Tal prova consistia em uma prova de simulação de sustos em crianças. O grande problema é que todos sabemos que Mike não é um bom assustador na prática, mas na final ele consegue a pontuação máxima. Todos ficam felizes, mas Mike acaba descobrindo que Sulley alterou o equipamento para níveis mínimos, fazendo com que Mike ganhasse roubando. Enquanto Sulley vai ao encontro da Diretora para falar sobre o que ele fez (ele fala e acaba sendo expulso), Mike decide invadir uma porta e tentar provar a todos que ele era um bom assustador. O que ocorre é que ele não assusta e fica preso no outro lado da porta. Sulley entra, mas a diretora fecha a porta. Mike lembra que leu a respeito de como abrir a porta pelo outro lado e com a ajuda de Sulley consegue (fazendo com que muita energia fosse gerada).
Eles acabam sendo expulsos, mas resolvem entrar na Universidade através de carteiros. No fim, nos créditos, mostram como eles chegaram a Assustadores.
No fim, cenas extras mostrando a lesminha lenta.
